Тест-системы на коронавирус

Тест-системы на коронавирус — компактные диагностические приспособления для обнаружения циркулирующих в кровеносном русле патогенов. В условиях пандемии особенно востребованы те, с помощью которых можно выявить инфицированного человека в максимально сжатые сроки. Сейчас исследования выполняются как зарубежными, так и отечественными системами. Из последних особенно хорошо зарекомендовали себя тесты российского производства «Вектор». Их чувствительность достаточно высока, а результаты готовы в течение часа.

Описание тест-систем

Тест-система для выявления коронавируса — картонная коробка, внутри которой находятся три компонента. Ее содержимое представлено реагентами для экстракции вирусной РНК, обратной транскрипции и проведения полимеразной цепной реакции. В составе последнего есть ферменты, буфер и праймеры — олигонуклеотиды, комплементарные определенным последовательностям генома коронавирусов. Тест-система «Вектор» содержит только реагент для ПРЦ. А вот выделение вирусной РНК и обратная транскрипция выполняются реагентами других зарубежных или отечественных производителей. Подобная недокомплектация объясняется необходимостью быстрого создания информативных тестов в условиях пандемии.

Большой популярностью у медработников и населения пользуются системы для определения в крови антител — иммуноглобулинов, которые вырабатываются иммунной системой в ответ на вторжение в организм коронавирусов. Причем на данный момент они востребованы не для установления инфицированных, а для обнаружения людей, которые переболели, имеют иммунитет к патогенам этого вида. Они могут быть донорами крови тяжело болеющим, тем самым помогая ускорить выздоровление и даже спасти жизнь.

Контрольный образец

Система для тестирования человека на наличие возбудителей коронавирусной инфекции состоит из положительного и отрицательного контрольных образцов. Внешне они не отличаются, выглядят как герметичные пробирки. Тест «Вектор» представлен раствором рекомбинантных плазмид, которые комплементарны какому-либо участку генома коронавирусов и очищенной водой.

В других тест-системах предусмотрено наличие и внутреннего контрольного образца — молекулы РНК, защищенной от воздействия ферментов. При проведении биохимического исследования она добавляется на начальном этапе. Ее введение на стадии выделения необходимо для одновременного прохождения с мишенью. На конечном этапе инертная молекула РНК сигнализирует о правильном проведении лабораторной диагностики.

Наличие контрольного образца в тест-системах на коронавирус позволяет снизить вероятность ошибки

В тест-системе «Вектор» такого внутреннего контрольного образца нет. Поэтому он не рассчитан на применение с первого этапа исследования. Если по какой-то причине при тестировании произойдет сбой, то обнаружить ошибку не получится.

Чувствительность

Аналитическая чувствительность лабораторного анализа — минимальное количество вещества, которое можно обнаружить этим методом. Достаточно капли венозной крови пациента, небольшого количества слизистого секрета из дыхательных путей, чтобы определить в ней инфекционных возбудителей. Не имеет значения, в какой концентрации в биоматериале они находятся. РНК коронавирусов при проведении ПЦР будет установлена при условии, что человек заражен.

Аналитическая чувствительность методик разнится:

• Качественная. Более низкая степень чувствительности, так как анализ проводится только для обнаружения РНК вирусов.
• Количественная. Высокая точность исследования, позволяющая рассчитать концентрацию возбудителей в 1 мл крови, определить их генотип.

Качественный ПЦР анализ проводится для выявления вирусоносительства. А количественный необходим для определения активности инфекционных возбудителей. Чувствительность тест-систем «Вектор» — 105 копий плазмид на миллилитр. Ее достаточно для выявления патогенов, циркулирующих в кровотоке. Но уже созданы и успешно апробированы более чувствительные диагностические системы.

Как работает

Максимальная аналитическая чувствительность в диагностике коронавирусной инфекции характерна для полимеразной цепной реакции (ПРЦ). Проведение исследование позволяет обнаружить в биологических образцах пациента даже микроскопические фрагменты РНК возбудителей. Благодаря лабораторному тестированию одновременно выявляется принадлежность вируса к определенному генотипу. А для обнаружения уже сформировавшегося иммунитета выполняется тест по методу ИФА.

Полимеразная цепная реакция

Это наиболее информативный метод диагностики коронавирусной инфекции. Его суть заключается в применении особых ферментов, которые многократно копируют РНК возбудителей патологии, находящихся в пробах биологического материала, в том числе крови. Даже при наличии одного фрагмента обнаруживается его присутствие, определяется видовая принадлежность вирусов. Своевременное проведение анализа ПЦР позволяет избежать развития инфекционных осложнений, самым грозным из которых является пневмония.

Изменения в крови при коронавирусе

Для чего необходимо подобное лабораторное тестирование:

• подтверждения первичного диагноза;
• установления вирусной нагрузки;
• выявления тяжести течения заболевания и возможной смешанной инфекции;
• определения лечебной тактики с учетом генотипов вируса;
• оценки динамики проводимой терапии противовирусными средствами или иммуномодуляторами.

В биообразцы добавляют реагенты, а затем держат в термостате при определенной температуре. Это позволяет создать оптимальные условия для клонирования фрагментов вирусной РНК. Ее нити разъединяются, что способствует присоединению специфического праймера, запускающего клонирование. Это своеобразная затравка для синтеза цепи в процессе репликации, входящая в набор реагентов современных тест-систем.

Наиболее информативны тест-системы на коронавирус, принцип действия которых основан на ПРЦ

Иммуноферментный анализ

Примерно через 6-7 недель в системном кровотоке зараженного человека начинают обнаруживаться антитела. Это иммуноглобулины, вырабатываемые иммунной системой для уничтожения вирусов. Выявляются антитела проведением иммуноферментного анализа, менее точного, чем полимеразная цепная реакция. При наличии признаков заражения на фоне его отрицательного результата назначается ПРЦ.

Обнаружить в кровеносном русле IgM или IgG возможно в лабораторных условиях за относительно непродолжительное время. В основе иммуноферментного анализа лежит реакция антиген-антитело. В качестве биологического образца обычно используется сыворотка венозной крови. Ее помещают в пластиковые планшеты с несколькими лунками. В каждой из них находится определенный очищенный антиген к антителам IgG и IgM.

После внесения биообразцов в лунках происходит формирование иммунных комплексов, но работает это только при наличии в крови иммуноглобулинов на коронавирусы. На их образование указывают ферментные реакции красящих веществ с высокомолекулярными комплексами. Теперь можно с помощью определенной инструментальной методики оценить оптическую плотность, сделать вывод о результатах тестирования.

Сколько ждать результатов

С помощью современных тест-систем можно определить инфицирован человек коронавирусами за 45-60 минут. А наличие в кровеносном русле антител устанавливают даже за четверть часа. Но стоит учитывать загруженность сертифицированных лабораторий в условиях пандемии. Поэтому ожидать результатов тестирования приходится несколько дней. Исключение — подозрение на развившуюся на фоне коронавирусной инфекции бактериальную пневмонию. В частных медицинских центрах, проводящих платное тестирование, загруженность не столь высока, как в государственных лабораториях. Так что данные исследования могут быть озвучены в течение дня.

Стоимость

В аптеках реализуются системы для определения уровня сахара, мочевой кислоты и даже наркотических веществ. Но приобрести тест для домашней диагностики возбудителей коронавирусной инфекции или антител не получится. Они есть только в лабораториях государственных или частных медицинских центрах. Стоимость тест-систем существенно разнится в зависимости от производителя, комплектации, используемого метода обнаружения патогенов.

Цены тест-систем на коронавирус включают стоимость услуг медицинских работников, включая их перемещение по городу

При выборе учреждения для диагностики коронавируса следует заранее уточнить цену предоставляемых услуг. Ведь она может складываться из стоимости забора биологических образцов, расшифровки полученных результатов.

Вот приблизительные данные, сколько стоит обследование на коронавирус:

• «Гемотест» — 1800 рублей;
• «Хеликс» — 900 рублей;
• «Медси» — 2 тыс. рублей.

Сейчас многие медицинские учреждения, преимущественно частные, предоставляют услуги забора биоматериала в домашних условиях. Это очень удобно, так как не приходится рисковать, добираясь до клиники, контактируя с большим количеством людей. Но подобное диагностирование обойдется значительно дороже. В его цену уже заложена стоимость поездок по городу и услуги медицинского персонала.

Особенности платного тестирования

Сдать платно биоматериал на обследование могут только те, кто не контактировал с людьми, инфицированными коронавирусом. Диагностика не проводится, если у человека есть признаки гриппа или любого острого респираторного заболевания. При оформлении заявки обязательно наличие паспорта. Исследование не может быть проведено на условиях анонимности. Предварительно персонал клиники обязательно соберет анамнез. Необходимо предоставить достоверную информацию о посещении зарубежных стран, возможных контактах с инфицированными.

Любой вид тестирования не гарантирует 100% точности и может давать как ложноотрицательные, так и ложноположительные результаты. О такой вероятности развития событий предупреждают разработчики систем в приложенной аннотации. Поэтому следует выбирать клиники, где исследования проводятся с помощью хорошо зарекомендовавших себя тестов.